根据《温州市科技项目验收管理办法（修订）》（温市科管〔2019〕8号）规定，经项目申报、初审、专家验收等程序，拟确定“CCN3通过调控ICAM-1参与急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合症的作用机制研究”（项目编号：Y20170256
）通过验收，现予以公示。现将有关事项通告如下：
1. 反映问题的方式和要求：在公示期内，任何单位和个人可通过来信、来电、来访的形式，反映公示对象存在的问题，以单位名义反映问题的应加盖公章，以个人名义反映问题的应当采用实名。反映问题要坚持实事求是，反对借机诽谤诬告。
2. 公示时间：2020年08月25日至2020年09月01日，共5个工作日。
3. 公示联系方式：温州市科学技术局农社处，0577-88962013；温州市科技局机关纪委，0577-88962055。
附：温州市科技项目验收内容
温州市科学技术局
2020年08月25日
附
温州市科技项目验收内容
项目（成果）名称
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CCN3通过调控ICAM-1参与急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合症的作用机制研究
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项目编号
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Y20170256
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负责人
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朱海萍
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验收方式
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网络验收
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验收结果
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通过
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主持验收
单位
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温州市科学技术局农社处
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验收时间
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2020-08-25
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完成单位
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温州医科大学附属第一医院
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项目组成
员
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董莉,董年,杨梅,汪伟伟,张岩,林素涵,裘丹萍,吴登敏 |
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验
收
意
见
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020年08月18日，温州市科技局对温州医科大学附属第一医院承担的温州市科技计划项目“CCN3通过调控ICAM-1参与急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合症的作用机制研究”（项目编号：Y20170256）进行验收，验收专家组审阅了相关资料，形成以下意见：
1、该项目提供资料齐全、规范，符合验收要求。
2、本研究首先一方面采用气管内滴注脂多糖（LPS，0.5mg/kg）制备ALI的小鼠模型，用免疫荧光和Western blot法检测CCN3蛋白在ALI小鼠肺组织中的表达情况。另一方面，A549人肺泡Ⅱ型上皮细胞株与LPS共同孵育制备体外肺损伤的模型，q-PCR和Western blot法分别从基因和蛋白水平检测CCN3在A549细胞中的表达变化。其次为了研究CCN3是否参与AEC Ⅱ细胞的炎症和凋亡的调控过程，通过瞬时转染技术构建CCN3沉默基因，运用ELISA法检测CCN3-siRNA转染后对炎症因子如IL-1β、TNF-α和TGF-β1表达水平的变化、流式细胞术和Western Blot法观察CCN3-siRNA对细胞凋亡率以及相关凋亡蛋白表达的影响。最后为研究CCN3对A549细胞炎症和凋亡的调控的信号通路，运用激光共聚焦法检测NF-κBp65核转位的变化分析其转录活性，并采用Western Blot方法筛选TGF-β/p-Smad2/3和NF-κB信号通路是否受到CCN3蛋白的调控，从而为预防或靶向治疗急性肺损伤（ALI）提供新的理论基础和线索。
3、本研究证实CCN3蛋白在ALI时显著增高，提示其是ALI中一个重要的转录因子。同时运用瞬时转染技术浅显地探索了CCN3表达抑制后对肺泡上皮细胞炎症和凋亡作用的影响，证实CCN3-siRNA显著抑制了上皮细胞炎症因子的释放和凋亡蛋白的产生，提示过表达的CCN3在ALI时通过促进上皮细胞炎症因子和凋亡蛋白的合成，放大炎症反应，加剧弥漫性肺损伤和凋亡。故小干扰CCN3可能作为潜在的重要调控分子，通过涉及TGF-β/Smad和NF-κB的信号通路参与肺泡上皮细胞的炎症和凋亡过程，为研究ALI的发病机制提供了新的作用靶点。
4、该项目已发表论文1篇。
验收专家组认为该项目已基本完成合同书规定的主要研究内容和研究指标，验收通过。
2020年08月18日，温州市科技局对温州医科大学附属第一医院承担的温州市科技计划项目“CCN3通过调控ICAM-1参与急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合症的作用机制研究”（项目编号：Y20170256）进行验收，验收专家组审阅了相关资料，形成以下意见：
1、该项目提供资料齐全、规范，符合验收要求。
2、本研究首先一方面采用气管内滴注脂多糖（LPS，0.5mg/kg）制备ALI的小鼠模型，用免疫荧光和Western blot法检测CCN3蛋白在ALI小鼠肺组织中的表达情况。另一方面，A549人肺泡Ⅱ型上皮细胞株与LPS共同孵育制备体外肺损伤的模型，q-PCR和Western blot法分别从基因和蛋白水平检测CCN3在A549细胞中的表达变化。其次为了研究CCN3是否参与AEC Ⅱ细胞的炎症和凋亡的调控过程，通过瞬时转染技术构建CCN3沉默基因，运用ELISA法检测CCN3-siRNA转染后对炎症因子如IL-1β、TNF-α和TGF-β1表达水平的变化、流式细胞术和Western Blot法观察CCN3-siRNA对细胞凋亡率以及相关凋亡蛋白表达的影响。最后为研究CCN3对A549细胞炎症和凋亡的调控的信号通路，运用激光共聚焦法检测NF-κBp65核转位的变化分析其转录活性，并采用Western Blot方法筛选TGF-β/p-Smad2/3和NF-κB信号通路是否受到CCN3蛋白的调控，从而为预防或靶向治疗急性肺损伤（ALI）提供新的理论基础和线索。
3、本研究证实CCN3蛋白在ALI时显著增高，提示其是ALI中一个重要的转录因子。同时运用瞬时转染技术浅显地探索了CCN3表达抑制后对肺泡上皮细胞炎症和凋亡作用的影响，证实CCN3-siRNA显著抑制了上皮细胞炎症因子的释放和凋亡蛋白的产生，提示过表达的CCN3在ALI时通过促进上皮细胞炎症因子和凋亡蛋白的合成，放大炎症反应，加剧弥漫性肺损伤和凋亡。故小干扰CCN3可能作为潜在的重要调控分子，通过涉及TGF-β/Smad和NF-κB的信号通路参与肺泡上皮细胞的炎症和凋亡过程，为研究ALI的发病机制提供了新的作用靶点。
4、该项目已发表论文1篇。
验收专家组认为该项目已基本完成合同书规定的主要研究内容和研究指标，验收通过。
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