项目（成果）名称

CMTM5通过诱导EGFR内吞抑制PCa细胞迁移和侵袭的作用机制研究

项目编号

Y20210171

负责人

李林锦

验收方式

网络验收

验收结果

通过

主持验收

单位

温州市科学技术局农社处

验收时间

2024-10-08

完成单位

温州市人民医院

项目组成

员

陈大可,鲍文朔,朱建龙,徐晓敏,尹博炜,陈武,方崇国

验

收

意

见

2024年09月26日，温州市科技局对温州市人民医院承担的温州市科技计划项目“CMTM5通过诱导EGFR内吞抑制PCa细胞迁移和侵袭的作用机制研究”（项目编号：Y20210171）进行验收，验收专家组审阅了相关资料，形成以下意见：
1、该项目提供资料齐全、规范，符合验收要求。
2、1.前期完成了CMTM5和EGFR在PCa中的表达情况的炎症。
2.通过稳转以及siRNA干扰试剂构建PCa细胞中不同表达水平的CMTM5，通过WB、RT-qPCR、CCK8、细胞划痕实验、Transwell实验，完成了对不同表达水平的CMTM5在PCa细胞对EGFR表达和细胞迁移与侵袭的调控功能的结果分析。
3.在明确CMTM5对EGFR调控作用后，通过免疫荧光共定位检测完成了CMTM5和EGFR细胞定位分析。
4.通过流式细胞术检测分析了过表达CMTM5对膜EGFR受体水平的影响。
5.通过对PCa细胞核质膜分离之后，通过WB实验完成了对各组亚细胞成分CMTM5与EGFR水平的检测。
6.通过免疫共沉淀的方法来明确CMTM5与EGFR之间是否存在相互作用。
3、1.通过PEI-AuNCs等纳米材料构建更加稳定表达的GFP-CMTM5细胞株以及更低的毒性副作用。
2.所运用的pei-AuNC具有有效实现CMTM5靶向递送的潜力，是一种很有前途的纳米材料。因此，我们研究了CMTM5基因在靶向PCa的传递系统中的治疗作用，发现PEI-AuNCs稳定地将pCMTM5 DNA传递到PC-3细胞中，并显著抑制 检测PCa的恶性进展，比游离pCMTM5具有更好的疗效。
3.通过实验发现，CMTM5不促进EGFR的特异性降解也不抑制EGFR的合成。而在PCa细胞中过表达CMTM5增强了配体诱导的EGFR从细胞膜表面的去除，大多数EGFR被内化到细胞中，并与CMTM5表现出显著的共定位。
4.CMTM5和EGFR并不参与直接的相互作用。内化的受体被溶酶体降解，使受体的信号通路失活。而且，这是第一个证实CMTM5引导EGFR进入内吞途径，促进EGFR从细胞膜表面去除，从而抑制其致癌潜能。
5.综上所述，本研究建立了一种具有良好生物相容性的PEI-AuNCs纳米传递系统，有效地将pCMTM5递送到PCa细胞。实验证据验证了CMTM5 是EGFR诱导信号转导的一种新的负调控因子，通过诱导EGFR内吞作用发挥其抗PCa的作用。
6.在纳米材料的协同作用之下，我们认为这种联合方法非常适合于体内靶向传递抗癌基因的治疗目的。此外，目前的研究结果对进一步深入研究EGFR的内吞作用和信号转导机制具有重要意义，也为前列腺癌的治疗提供来新的研究方向。
4、该项目已发表SCI论文1篇。
该项目经费资助1.00万，使用基本合理。
验收专家组认为该项目已基本完成合同书规定的主要研究内容和研究指标，验收通过。