项目（成果）名称

细胞死亡途径的分子开关“Caspase-8和RIP3”在腺病毒感染肺泡上皮细胞中的作用及机制研究

项目编号

Y20210001

负责人

温顺航

验收方式

网络验收

验收结果

通过

主持验收

单位

温州医科大学

验收时间

2024-07-01

完成单位

温州医科大学附属第二医院

项目组成

员

张海邻,林立,吕芳芳,林祖潘,施瑶铠

验

收

意

见

2024年06月22日，温州市科技局（委托温州医科大学）对温州医科大学附属第二医院承担的温州市科技计划项目“细胞死亡途径的分子开关“Caspase-8和RIP3”在腺病毒感染肺泡上皮细胞中的作用及机制研究”（项目编号：Y20210001）进行验收，验收专家组审阅了相关资料，形成以下意见：
1、该项目提供资料齐全、规范，符合验收要求。
2、该项目依据合同书规定的研究方案，完成2项关键技术。掌握HAdV-7病毒增殖与病毒感染细胞模型构建和流式细胞技术检测细胞死亡形式的关键技术。caspase-8调控细胞凋亡在腺病毒感染肺泡上皮细胞中的作用及机制和RIP3调控程序性坏死在腺病毒感染肺泡上皮细胞中的作用及机制研究，两方面研究内容均已完成。HAdV-7感染A549细胞，感染时间分别为12 小时、24小时、36小时、48小时和60小时，结合广谱凋亡抑制剂Z-VAD-FMK，caspase-8抑制剂Z-IETD-FMK，caspase-9抑制剂Z-LEHD-FMK TFA和RIPK3抑制剂GSK'872干预，分为空白对照组、HAdV-7感染组、DMSO+HAdV-7感染组、Z-VAD-FMK+HAdV-7感染组，Z-IETD-FMK+HAdV-7感染组，Z-LEHD-FMK TFA+HAdV-7感染组和GSK'872+HAdV-7感染组。提取各组细胞进行流式细胞检测分析细胞死亡形式；再提取各组蛋白质，进行蛋白质印迹分析，检测细胞凋亡相关蛋白（Caspase-3、-8、-9等）和细胞坏死性凋亡相关蛋白（RIPK1、RIPK3、MLKL等）的表达变化；最后提取各组病毒RNA，通过实时荧光定量PCR检测各组病毒载量的变化。项目研究涉及合理，实施规范，结论可靠。
3、细胞凋亡与腺病毒感染之间的相互关系，展现了病毒生存策略与宿主防御机制之间的平衡。理解这种动态互作对于开发针对病毒感染的治疗干预和临床利用凋亡途径具有重要意义。而坏死性凋亡是一种与细胞凋亡不同的调控性细胞死亡形式，它依赖于一条特定的分子途径，涉及RIPK1，RIPK3和MLKL。虽然，目前没有具体关于人腺病毒感染过程中坏死性凋亡作用的研究，但鉴于病毒与宿主细胞死亡途径的交互作用的复杂性，进一步研究腺病毒可能如何影响或受到坏死性凋亡影响，可以为其发病机制和潜在治疗策略提供有价值的见解。
4、该项目已发表论文2篇。
该项目经费资助2.00万，使用基本合理。
验收专家组认为该项目已基本完成合同书规定的主要研究内容和研究指标，验收通过。